1. 了解腦立體定位注射實驗技術。
2. 掌握腦立體定位注射儀及腦圖譜的使用方法。
腦立體定位注射實驗技術被廣泛的運用于腦的損毀、刺激和腦電記錄的精確定位中，成為研究腦結構和功能必不可少的工具。腦立體定位注射實驗技術主要是使用腦立體定位注射儀作為定位儀器，利用某些顱骨外面的標志（如前囟、后囟、外耳道、眼眶、矢狀縫等）或其它參考點所規定的三度坐標系統，來確定皮層下某些神經結構的位置，以便在非直視暴露下對其進行定向的刺激、破壞、注射藥物、引導電位等研究，是神經解剖、神經生理、神經藥理和神經外科等領域內的重要研究方法。常用的腦立體定位注射實驗動物，如大鼠、小鼠、貓等高等哺乳動物以及鳥類，其均有完全的外耳道，可用（耳棒）來定位。在確定了顱外標記之后，就可按腦立體定位注射實驗圖譜所提供的數據進行定位操作。
腦立體定位注射儀，微操作儀，常規手術器械，鉆孔針，紗布，干棉球，酒精，0.4%戊巴比妥鈉（麻醉劑，現配現用），生理鹽水，1ml注射器，3%雙氧水， 小白鼠。
1.1 校驗儀器
定位儀經過搬動或長期不用后，使用前需先加以校驗。重點是檢驗電極移動架各滑尺是否保持直角，可用三角板測定各滑尺所成的角度是否是直角；各銜接部與螺絲有沒有松動；滑尺是否太松；檢查主框兩臂的平行情況；最后觀察固定頭的裝置兩側對稱程度，小框是否與主框平行。檢查儀器無故障后，可進行下列校驗性操作：
（1）將兩側耳桿柱旋松，在主框上前后滑動，然后再按照原規定刻度裝好，看兩側耳桿尖是否完全對正。
（2）取下一側耳桿，將一側電極移動架裝好，前后左右上下移動各滑尺，使裝在電極夾上的金屬定位針尖正對耳桿尖的中心，記下各滑尺的刻度讀數，再卸下移動架再裝上，并按上法測定耳桿尖的部位，記下三個滑尺的讀數，反復操作取平均數首先將放置水平的腦立體定位儀上的兩個滑道，按實驗的要求調節好合適的高度后。
（3）然后再用水平尺調正好兩個滑道的前后、左右水平。這時再把安置在滑道上的手動微推進器按上面的刻度調節垂直。
1.2 確定腦立體定位零點，小鼠腦定位的系統大致分兩種：
（1） 用耳間線中心定位，首先將兩個耳棒尖端在定位儀滑道中間部位彼此相接觸（兩個耳棒讀數相同），旋緊鏍絲。然后取下一側耳棒，另一耳棒不動。調節移動推進器，使校驗電極尖端與耳棒尖端的中心點相觸，即為A點（即耳間線中心點），并記下刻度值。然后，將推進器水平移動到門齒鉤的上方，將門齒鉤平面與校驗電極尖端相觸。這時就定出外耳道中心點與門齒牙板上面上沿之間的水平切面0點，記為H0。這時，動物的前囟和后囟基本處在一個水平面上，相差0-0.1mm。另外，規定耳間線中心點以上為+，向下為-；向嘴側為+，向尾側為-。
（2）用顱骨標志定位（常用前囟），即以前囟為嘴尾側0點，由前囟向嘴側為+，向尾側為-，其它與上面定位方法相同（圖示）。
（1）動物麻醉：小鼠，體重20-30g，稱重后以0.4%戊巴比妥鈉腹腔麻醉注射時必須緩慢，隨時注意動物狀態。
（2）小鼠頭部固定：將小鼠的門齒固定于腦定位儀上頜固定器，然后把一側的耳捧推入動物的外道后，使動物的頭在處于兩滑道正中。再將另一耳捧推入另一側的外耳道。這時觀察兩個耳棒的刻度一致后，將兩耳棒上的固定螺絲扭緊，在將牙齒固定器上壓鼻環壓下后扭緊（鼻環、耳棒的松緊度調節適宜為好），這時從各個方向推壓動物頭部"均不會出現移動。
（3）開顱鉆孔前的備皮：剪去動物頭部毛，用2%碘酒及75%酒精棉球作頭部皮膚的消毒，沿矢狀縫作一3cm長的皮膚切口，分離皮下組織，用雙氧水清潔顱骨表面的筋膜及肌肉并剝離，推開骨膜，暴露前囟、人字縫及矢狀縫。
（4）確定標準中線：將金屬定位針向下移動到矢狀縫上方后，再前后移動定位針，使定位針定位到前囟。
（5）小鼠海馬定位：用定位針在前囟后2mm, 矢狀縫旁開2.5mm處定位一點，即為海馬的平面位置，然后在此點上用鉆孔針在顱骨上鉆一小圓孔。
（6）注射藥物：小鼠海馬則位于該圓孔下2 mm，將1ml注射器吸入藥物安置到MC-5微操作儀上，操作儀器使注射器針頭由小鼠腦鉆孔處下降2mm時完成藥物注射到小鼠腦海馬處。
（7）制作腦組織切片：將小鼠腦制作成切片，顯微觀察小鼠腦中紅染料位置來驗證小鼠腦海馬中是否定位準確。
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