【構建造模實驗動物模型選擇與飼養代養動物寄養服務注意事項】

做動物實驗，首先要做的事就是養好實驗動物，這是動物實驗成功的基石。做好動物實驗的第一步看似很簡單，但是在飼料、飲水及及生活環境有不少需要注意的細節。

第一、實驗動物的選擇要點

1. 怎么選擇合適實驗動物？

1）參考《醫學實驗動物學》，書中比較詳細地介紹了常用實驗動物的解剖生理、生物學習性等等，最主要的是它為你選擇什么樣的實驗動物提供了重要的參考。因此，系統學習或者零星地翻閱《醫學實驗動物學》是保證合理選用實驗動物的基礎之一。

2）參考大量文獻，參考別人是如何選擇的，再結合自己對實驗動物的了解。如：做高血脂、動脈粥樣硬化，大多數會選擇大鼠、兔子，也可以選金黃地鼠、鵪鶉，少數會選小鼠。

2. 采取什么樣的方法造模？

1）參照《藥理實驗方法學》，此書重點突出了與藥理學研究密切相關的實驗方法與技術，如藥理實驗設計、實驗動物的選擇、實驗動物模型的建立與評價、實驗指標的選擇、量效一時效關系、安全性評價、細胞培養技術以及與藥理作用有關的機制研究的方法與技術等。

2）參照文獻。造模方法有時候也決定你的實驗動物選擇，

3. 多去了解一下實驗中可能出現的問題。要對整個實驗過程有全面的計劃，并對可能出現的問題有應對的措施。有不少人做實驗時根本沒有考慮可能出現的失誤，因而在實驗出現問題時茫然無措。即使是造同樣的疾病模型，不同的動物表現可能有不一樣的地方。要對這些問題有充分的了解，并要進行必要的預試。還要了解動物的習性，進行必要的護理。

第二、如何辨別實驗動物的雌雄

辨雌雄的目的就是為了分籠飼養，避免雌雄同籠而交配，無法進行實驗。那么如何辯別？當然是看生殖器了。一般像狗，猴等大動物比較容易辨別；如：小鼠、大鼠、兔中小體型的動物則稍微難辨別，這時候可以用下列方法來辨別：

1. 看肛門與生殖器之間的距離：雄性隔得遠，雌性隔得近。雄的生殖器與肛門間有陰囊，不過幼齡時不太明顯。

2. 針對幼齡的動物而言，雄性陰莖朝頭的方向突出，可輕輕擠壓包皮使其露出而確認。雌性較小時可見閉合的陰道口，擠壓亦可張開。像兔、豚鼠等，陰莖短小，故較難辨認，最好是擠壓生殖器以確認，生殖器處呈O型者，為雄性；生殖器處呈V型，下端裂縫延至肛門者，為雌性。

3. 看乳頭或睪丸。成年的動物比較好辯認，雌性有乳頭，雄性有睪丸。幼齡動物其乳頭、睪丸并不是那么明顯的。

第三、實驗動物的適應性飼養

所謂適應性喂養，是指實驗動物由繁殖地或供應商處搬到實驗動物房以后，在實驗之前，為了使之適應環境而喂養幾天的過程。這一過程非常重要，但往往不受人重視。這一過程一般至少為期三天，最好是一周。

怎樣使之適應？

1. 配置好飼料、飲水、墊料，做好通風，12h-12h明暗交替。努力使之在“新家”舒服地過好日子。

2. 密切觀察其毛發、排泄物、活動情況。這是考察動物是否有病的外在表現。

3. 注意與實驗室原有飼養的動物隔開一定的距離。其它動物的聲音、排泄的氨對新來的動物有一定的影響。如發現動物有個別狀態不佳者，應立即隔離，并分析原因；有三分之一以上狀態不佳者，高度懷疑動物有疾��；有死亡者，高度懷疑此批動物有問題。
在此期間發現動物有病者，應更換別的批次動物。若是實驗動物體重尚達不到實驗所要求，可適當延長適應性喂養的時間。

第四、實驗動物的飼料

普通飼料：

1. 小鼠、大鼠的飼料。小鼠、大鼠的飼料為全價飼料，即不需要再添加任何營養成分。

2. 豚鼠、兔子的飼料。豚鼠、兔子飼料不是全價飼料，在飼料之外，需要加少許青菜或青草，否則有的狀態不佳甚至死亡。

用量：對于小鼠，每日的飼料在4~8g，大鼠在15~20g；豚鼠在15~30g；兔在30~80g。需要注意他嚙齒類動物行為——喜歡咬東西。因為它們的牙齒終生生長，于是它們要磨牙，這樣，投予過多飼料它們也會浪費掉。兔雖屬兔型目，但有類似嚙齒目動物的行為。

特殊飼料：

1. 高脂飼料

常用配方：

另可酌加膽酸鹽、維生素D3等

具體步驟：

1）將膽固醇、丙基研細，二者充分混合；

2）雞蛋煮熟，剝取蛋黃，捏碎，吹干，研成細粉，與前二者混合好；

3）如要加膽酸鹽、維生素D３，亦將其混合好。

4）以“等量遞增法”將上述藥料加入到普通飼料粉末中；

5）將豬油化開，噴灑在飼料粉末之中混勻；

6）噴適量水為黏合劑，加到制粒機中制成棒狀飼料。

在此，特別提出“等量倍增法”。因上述造模藥料與普通飼料的量相差懸殊，直接加入其中是難以混勻的，這樣會造成以后動物攝入的造模的膽固醇，甘油三酯差異大，不利于實驗。而所謂“等量遞增法”就是：將上述藥料與差不多相等的普通飼料粉末充分混勻；得到混合物后，再加與此混合物相等量的普通飼料混合，充分混勻；如此類推。例如：藥料為200g，那么普通飼料也為200g，第一次混合后總重量即為400g，第二次混合即加入400g普通飼料，混合后總重量為800g，以此繼續混合下去，這樣就成倍地混合好。

如果飼料沒配好，實驗可能前功盡棄。因此高脂飼料要親自配，且按要求、按科學規律配（等量遞增法）。飼料成形后，要攤開置通風處吹干，或以電風扇吹干，不要受熱，尤其在春夏之季，因其中含有脂肪油類，且因制飼料時要經過高溫壓制，放在一起易發熱、生霉。

一次配制飼料不宜過多，一般可配制實驗全程所需飼料的一半，后半段根據前面所消耗的實際量來酌性增減，但需給足量，寧多一點，不能少。高脂飼料比普通飼料要軟、易碎，要注意輕拿輕放，底部碎屑可收集起來，再壓制成型。

2. 低鐵飼料

3. 缺鋅飼料

第五、實驗動物的飲水

實驗動物級別的不同，飲用的水也不同。通常情況下，普通級動物飲水達到生活飲用水標準即可；清潔級、SPF要求滅菌，可高溫高壓滅菌，也可以加次氯酸鈉，或以鹽酸調PH到2.5~3.0，后者又稱之為酸化水；無菌動物飲水只能高溫高壓滅菌。
飲水管理注意事項：
1. 裝水時，不可裝到全滿，否則因大氣壓的原因，水出不來。
2. 勤換水。最好是每天一次。換水時，要清洗瓶身內部及瓶嘴。因動物喝水時，可將口中的微生物回送至瓶內，尤其是在瓶嘴內面。
3. 一般水瓶要消毒后再使用。

4. 要注意是否漏水。漏水則有可能將動物淹死（主要是小鼠）。蓋好瓶塞后，一定要看一看。確認無事方可離開。

第六、實驗動物的籠具

隨著時代的變遷，籠具不斷發生變化。新中國成立之初，有時候用陶罐作為動物的籠具，而現在越來越多先進的籠具被應用到科研中，如運輸籠、繁殖籠、具有獨立送風系統的籠具（IVC）等等。還有通過信息技術將現有IVC籠具進行信息化改造，結合物聯網RFID技術、網絡技術和數據分析技術實現動物飼養的便捷化、智慧化管理，可實現對籠位的在線管理。完全實現飼養的信息化。

第七、實驗動物的墊料

所謂墊料是指墊于籠具底部用于動物保溫、吸水、做窩等作用的物質，目前所用的大多數墊料是家俱廠的刨木花。
1. 要注意刨木花的種類。不是所有的木材形成的刨木花都可以做墊料。松樹等針葉林類的刨木花多含芳香類物質，對肝藥酶有一定的影響。進而影響到藥物的生物利用度、生物轉化等。對實驗結果產生無形的影響。
2. 要注意其片型大小。太大或太碎的都不行。太大則籠具底墊不勻，太小則容易引起動物的肺部疾病或不適。因目前墊料生產不規范，多為家俱廠副產品。有的里面竟會有些小的木頭，有的還有廠家的生產計劃等廢棄資料，有的有大量很細的鋸屑。這些細的鋸屑易產生揚塵，影響動物的呼吸系統。
3. 吸水程度。墊料主要是給動物一個生活的微環境，有一定的保溫作用，同時也起到吸收糞便中的水分的作用。通常決定什么時候要更換墊料就是看其被尿浸濕的程度。從某種意義上來說，墊料即是動物的“尿布”，只是比尿布的功能更多一點而已。
4. 是否消毒。按規定，墊料都是要消毒的。因為其中可能有昆蟲，微生物等。而動物的糞便等混在墊料中，加之適宜的溫濕度，將會成為微生物等良好的滋生場所，所以要消毒。

第八、實驗動物的飼養環境
動物房最基本的要點：溫濕度控制、做好換氣、盡量減少粉塵、及時換墊料。此外，除稱重、給藥等基本操作外，不要在動物房進行手術等其它實驗操作。
下圖所示為清潔級動物房的設計示意圖。其主要原則是：人流與物流分開，即人員進出通道與動物、飼料等其它物品的通道分開；逐級控制，主要是控制空氣中的粉塵及菌落數。

第九、實驗動物的護理

在藥物造�；蚴中g之后，動物往往會有一個危險期。這一時期需要精心護理。如有不慎，則可能造成死亡，或者狀態不佳，影響后續實驗的進行。
1. 術后可能的感染及其應對措施。術后一般要保溫2４小時，必要時可注射青霉素等抗生素。如果本身就是造成感染模型，用藥物干預看其效果的話，則不能用除干預藥物以外的抗生素了。
2. 造模后的危險狀態及其應對措施。例如：糖尿病模型的前三天，糖尿病造模后有一個低血糖時相，是因為胰島大量破壞后，釋放出大量胰島素至血中，引起低血糖。必要時要使動物加葡萄糖，使之渡過危險期；急性腎衰模型，或一側次全切除的慢性腎衰模型等，都要密切觀察�？傊�，影響肝、腎、腦、心等重要器官的急性造模的動物，需要多加注意。
3. 密切監測。動物出現狀態不佳基本上是兩種原因。一是動物本身的體質。有的動物在搬進實驗動物房后，由于適應性的問題，可能出現體質有所下降。二是造模后形成的。多數動物實驗是要造模的，造模是人為地引起疾病，對動物的損傷較大。因此，日常的監測是不可少的，有的只需觀察，有的要采取一定的措施，如：隔離觀察、抗感染。

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