【質譜檢測組織成像采集高通量藥物篩選實驗委托服務】
高端適用性廣的MALDI TOF/TOF系統工作速度比傳統系統要快20倍,高達50像素點/秒的最快采集速度可以滿足非標記超高通量藥物篩選(uHTS)以及高分辨率質譜組織成像的需求。非標記質譜檢測能有效加快和簡化藥物篩選和測試方法的開發,并能避免人為因素的影響。檢測不需要使用SPE和HPLC柱,比LC/SPE-MS方法能減少大量溶劑的消耗,一般100nL樣品量就足夠分析使用。搭配全新設計軟件系統,能在8分鐘內完成1536個樣本的檢測,系統同時兼容96,384,3072和6144的點樣形式。
質樸檢測組織成像采集高通量藥物篩選原理:將MALDI質譜離子掃描技術與專業圖像處理軟件結合,直接分析生物組織切片樣本,產生樣本中所有化合物質荷比(m/z)的二維離子密度圖,并對組織中化合物的組成、相對豐度及分布情況進行高通量、全面、快速的分析。這項技術不局限于特異的一種或者幾種分子,它可在組織切片中原位檢測蛋白質、脂類、藥物分子等不同的物質,并提供這些物質在組織中空間分布的精確信息,同時可進行相對定量。該方法可以高效精準地獲得藥物分子或生物標志物的空間分布,因此在藥物代謝研究和生物標志物發現中具有廣泛的應用。
質譜檢測組織成像采集高通量藥物篩選技術的應用
1. 蛋白質純度分析以及分子量測定
MALDI-TOF是一種軟電離技術,可用于檢測目標蛋白或多肽是否存在,有無二聚體存在,以及進行純度情況的大體評估。MALDI-TOF鑒定分子量范圍也非常廣,能夠鑒定700-1000000Da的蛋白分子量,準確度高達0.1%~0.01%,遠遠高于目前常規應用的SDS電泳與高效凝膠色譜技術。
2. 蛋白指紋譜鑒定(PMF)
肽質量指紋譜(Peptide Mass Fingerprinting, PMF)是蛋白質被識別特異酶切位點的蛋白酶水解后得到的肽片段的質量圖譜。由于每種蛋白的氨基酸序列(一級結構)都不同,當蛋白被水解后,產生的肽片段序列也各不相同,因此其肽質量指紋圖也具有特征性。將肽譜圖與數據庫中蛋白質理論肽譜圖對比,從而鑒定蛋白質。因此,分子質量的精確度是PMF的關鍵指標所在,但蛋白質的翻譯后修飾可能使PMF的質量數與理論值不符,從而對蛋白鑒定的準確度有一定影響。
3. MS/MS串聯質譜法測序
串聯質譜法(MS/MS),是目前常用的質譜鑒定方式。MS/MS先通過一級質譜測定肽段質量,再選取豐度高的肽段進行二級質譜分析,在二級質譜中肽段相互碰撞導致氨基酸鍵斷裂,產生肽段碎片離子經由檢測器分析,從而得到篩選肽段的氨基酸序列信息。MS/MS利用豐富肽段碎片的精確質量信息,更具有特異性、可信度,極大地增加了數據庫檢索的可靠性。
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