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    一針見「耗子尾汁」:手把手教會你「小鼠尾靜脈注射」操作技巧!

    發布時間:2023-06-03 19:33:15  來源:分子生物醫學微生物基因肌酐血常規檢測肝功能腎功能檢測分析診斷篩查臨床醫學實驗動物模型實驗外包委托大小鼠腦室海馬腦立體定位注射慢病毒藥物細胞實驗創新藥物臨床前研究試驗毒理代謝藥理藥代動力學藥效實驗安全性  瀏覽:   【】【】【

    小鼠尾靜脈注射,是動物實驗中非常重要的一項實驗技術,在小鼠靜脈給藥等實驗中發揮著無可替代的作用。但是小鼠尾靜脈十分纖細,不易觀察,注射操作難度很高,「是個技術活兒」。

    通過小鼠尾靜脈的解剖結構來定位理想穿刺點


    「知己知彼,百戰不殆」。


    成功的尾靜脈注射離不開對小鼠尾部解剖結構的深入理解。有研究通過鼠尾橫斷面連續切片,報道了鼠尾的詳細解剖結構[1],盡管研究使用的是大鼠而不是小鼠,但兩者在尾部的解剖結構上十分相似,只是小鼠的尺寸更小。


    從圖1(左)中可以看到,鼠尾的血管主要由三條靜脈(實心箭頭)和一條中央動脈(空心箭頭)組成,其余都是一些小的分支血管。中央動脈靠近腹側,且位置較深,觀察起來不容易,也不適用于穿刺。


    背側靜脈和側面的兩條靜脈位置較淺,都可以作為穿刺的候選。


    其中,側面的兩條靜脈相對背側靜脈更粗(尾部遠端管腔內直徑0.35 mm VS 0.18 mm),且走向更為清晰,通常作為穿刺的第一選擇。簡化的示意圖1(右)可以幫助大家更好的理解小鼠尾部的解剖結構。


    圖1

    不止是靜脈的選擇,鼠尾穿刺位置的選擇也同樣重要。穿刺位置的血管首先要足夠粗,在此基礎上,位置越淺,越容易穿刺成功,這點后續還會講到。
    從圖1(左)中可以看到,近端的血管位置較深,遠端的血管位置較淺,但血管的管腔內徑并沒有隨著鼠尾的變細而成比例的變細。在鼠尾遠端,血管仍保持較粗的管腔內徑。這就為定位一個理想的穿刺點提供了可能。
    因此,我們一般首選離鼠尾遠端約1/3的位置的側面靜脈進行穿刺。

    選擇合適的注射器


    小鼠尾靜脈的結構,導致我們對注射器提出了更高的要求。
    我們需要選擇針頭足夠細又有一定長度的注射器。那么,到哪里去找到合適的注射器呢?注射器針頭粗細規格表示方法為數字+Gauge(G)。數字越大,代表針頭越細。
    用于小鼠尾靜脈的針頭規格,最好在29G以上。目前,市面上容易買到的29G以上的注射器,主要是胰島素注射器。其規格有29G,30G和32G。參數如表1。

    但是32G的注射器針頭長度太短,只有4 mm,并不方便操作,因此選擇針頭長度為8 mm和13 mm的30G和29G胰島素注射器,是最為合適的。

    注射前一個人可以用微型手電筒或LED小夜燈等緊貼尾靜脈,在燈光的照射下,尾靜脈會被很清晰的顯示,此時,另一個人便進行注射操作。但該操作不易實現,需要多加練習,培養默契。


    小鼠尾靜脈注射的操作步驟:

    1.首先要固定小鼠,最簡單的固定方法就是把小鼠放在盒子里面,讓它的尾巴伸在盒蓋的外面,用手抓住小鼠尾巴,輕輕往外拽,就可以固定好小鼠了。這種固定方法,小鼠可以在盒子里面活動,固定的也不是很牢固,但是只要你尾靜脈注射的手法很熟練,就足以用來注射了。還有的固定方法就是用一個小的圓筒,最好是金屬做的,(可以在當地的鐵匠鋪,或者買白鐵鋪里面定做)首先是金屬比較結實,而且可以用來固定在鐵架臺上,方便操作。圓筒的一段有個蓋子可以拿下來,蓋子中間有個小孔,可以讓小鼠的尾巴伸出來(中間的小孔可以用膠布纏一下,防止銳利的邊緣割傷小鼠尾巴)。另外一段可以用金屬網的結構,網的形狀可以做成子彈頭的頭端形狀。網狀結構可以讓光線透近來,方便小鼠鉆進圓筒里面。圓筒的長度約10cm,直徑約 3~4cm,可以做個系列長度和直徑的圓筒,適合不同大小的小鼠。

    2.固定好小鼠后就是注射了,一般用一次性的1ml的注射器就可以了,玻璃 的1ml的注射器也可以用,針頭用4號的就可以了。

    3.注射前首先要讓小鼠的血管充盈?梢圆捎75%的酒精棉球擦拭的方法或者采用溫水浸泡的方法。若小鼠的血管很不清楚,推薦采用溫水浸泡的方法,水溫以不燙手為宜。溫水浸泡2~3分鐘后,取出小鼠尾巴,用干棉球擦拭。等一會兒,待血管充盈后,酒精棉球擦拭后就可以進針了。若血管還不充盈,可以反復用溫水浸泡,切不可冒險注射,除非你手法很熟練,另當別論。

    4.小鼠尾部共有四條血管,一般認為左右的兩條靜脈比較容易注射,多采用這兩條靜脈進針。一般要求進針部位靠近小鼠的尾端,這樣若注射失敗的話,還可以再向上選擇進針點。但是進針部位也不可以太靠下,因為越往下,靜脈越細,操作越難,一般以小鼠尾巴下三分之一的位置比較好。

    5.最關鍵的就是進針了。進針時操作者左手食指和拇指固定住小鼠的尾巴,讓小鼠的尾巴在經過拇指后向下彎曲,進針點靠近拇指指甲。針頭和血管呈約30°角,針尖斜面朝上,輕輕挑刺入皮膚后針頭立即和血管平行,一般情況下一次就可以進入血管,可以將針頭刺入血管一大半,左右輕輕晃動針頭,確定針頭在血管內,就可以推注藥液了,正常情況下,推注的過程應該沒有明顯阻力,血管也不會鼓起。推液時動作宜輕柔,若發現血管鼓起,那是針頭沒有刺入血管,需立即拔出針頭。

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